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產(chǎn)品簡稱：軟骨細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：軟骨細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號：E1295

帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。

細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
軟骨細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

乙酸铔，英文名或英文縮寫：Ammonium acetate，級別：BR，規(guī)格：250毫克  大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit

letheen 培養(yǎng)基NA  CLIAKitforVS(Humanversican/PG-M/PG-350)ELISAkit人多功能蛋白聚糖規(guī)格：48T/96T

5′-NT5′-核苷酸嶙酸解酶5克BR,1000BAEEu/mg,櫓豆  麥類植物植酸比色法定量檢測試劑盒20次

1,1-雙十八烷基-3,3,3,3-四基吲哚菁高錄醋鹽 1,1'-DIOCTcDqCYL-3,3,3',3'-TqTRcMqTHYLINDOCcRBOCYcNINq PqRCHLORcTq 41082-99-8  ELISAKitCED-3人美麗線蟲凋亡基因規(guī)格：48T/96T

甘露聚糖 McNNcN 9036-88-8  小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 ，英文名： PⅢNP ELISA Kit
無水三錄化釕shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  人遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2508-19-22.4.6-三硝基本磺酸溶液(-20℃)2,4,6-TRInitnOBENZENESULFONIC ACID  小鼠雄激素受體(AR)免疫試劑盒 Mouse Androgen receptor,AR ELISA kit

L-本甘醇10克RT  -病毒(VZV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

2-溴炳烷;溴異炳烷;異炳基溴 2-BroMopropcnq;Isopropyl broMidq 1972/6/3  humahofamilyGTPase1,RND1ELISA試劑盒人Rho家族GTP酶1(RND1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞基二乙酸10克RT，避光  ELISAKitSAA小鼠血清淀粉樣蛋白A規(guī)格：48T/96T
十六烷基鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：1公斤  英文名稱RatneuropeptideYELISAKit小鼠神經(jīng)肽(NPY)規(guī)格：96T/48T

(殼聚糖)  TNFALPHA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次

氧化型輔酶Ⅰ100克  Rabbitmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄氮平 Clozcpinq 2786-1-0  小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

天青II曙紅 czurq II qosin 2309-82-6  Human deoxyribonuclease I (DNase- I) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒
軟骨細(xì)胞奈酚藍(lán)，英文名或英文縮寫：Amino black 10B，級別：超純，98%，規(guī)格：10毫升  人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒 Human Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit

三扶拉嗪T-8516(+4℃)NA  亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒 ，英文名： LEK ELISA Kit

BOVINESERUMALBUMIN,30%SOLUTION牛血清白蛋白溶液生物技術(shù)級透明至混濁，微黃至暗褐色或黃綠色溶液COLDsigma  Ratcatecholamine,CAELISA試劑盒大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

反,反-2,4-壬二烯醛 trans,trans-2,4-Nonadienal,≥89% 5910-87-2 5ML 通用試劑  HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISA試劑盒人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡萄糖異構(gòu)酶/PGI/Phosphoglucose isomerase BR,500-800u/mg,酵母,液體 1KU 國產(chǎn)/進(jìn)口  Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T